里氏木霉β-木糖苷酶的分离纯化、酶学性质及水解机理研究

通过硫酸铵沉淀、超滤脱盐、离子交换层析、凝胶过滤层析等手段，从里氏木霉（Trichoderma reesei）RutC-30木聚糖酶粗酶液中分离纯化得到分子质量110．8ku、比活力为61．99IU／mg的电泳纯β-木糖苷酶。酶学性质研究结果表明：该酶反应以温度60℃、pH值3．5为宜，在60℃以下、pH值3．0-8．0酶活性稳定，且该酶作用于对硝基苯基-β—D-木糖苷的k_m值和V_max值分别为0．29μmol／mL和169．99IU／mg。酶水解机理研究结果表明，该酶从低聚木糖的非还原性末端切断β-1，4-糖苷键释放出木糖，其最适作用底物是短链的低聚木糖，随着低聚木糖碳链的增长，酶作用效... View More